在生物制药行业，单克隆细胞株的开发是关键。为了确保产品的一致性，所使用的细胞株需来源于单个细胞。传统的单细胞克隆流程通常包括一至两轮的单细胞克隆，通过孔板成像确认单细胞是否成功分配。然而，传统的稀释法或流式细胞术并未能有效证实是否仅分配了一个细胞，导致单克隆性的确认极度依赖于孔板成像的准确性。孔板成像过程中的固有误差，加之离心操作的必要性，降低了在特定工作流程中实现单克隆性的可能性。因此，高精度的成像技术和检测方法变得至关重要。

尊龙凯时(中国区)人生就是搏所推出的UPSIGHT20（影像式单细胞打印与成像系统）通过双重验证机制，成功解决了细胞分配中的难题。该系统的第一次验证是借助一系列喷嘴图像记录单细胞的分离情况，第二次验证则使用3D全孔成像技术直接捕获液体体积的图像。这种3D成像技术能够全面捕捉液体体积，避免了克隆后所需的任何离心步骤。此外，UPSIGHT20支持菌落生长后的实时监测，兼容96、384和1536孔板，非常适合高通量的工作流程，单细胞分配效率超过98%。

研究对4000个单细胞和近1000个生长的菌落进行了分析，结果显示，结合喷嘴图像与3D全孔成像的技术，细胞株的单克隆性概率超过9999%，且不需依赖荧光染色或成像技术。这一创新的工作流程在单细胞分配、孔内验证及菌落跟踪中提供了完整解决方案。

在单细胞分配过程中，UPSIGHT20通过喷嘴生成微型自由飞行液滴，并实时成像以评估液滴中是否包含0、1或多个细胞。如果液滴被判定为包含0个或多个细胞，或者即使只有一个细胞，但其特征未达到预设标准，该液滴将被丢弃。相反，若检测到符合条件的单细胞，该细胞则将被准确分配至孔板中。

成功分配的每个单细胞生成五张确认图像，分配后还需借助孔板下方的第二台相机进行3D全孔成像，以进行二次确认。3D全孔成像捕获的图像数量取决于孔板的类型和孔中介质的体积，消除了对孔板进行离心的需求。通过这样的方式，成像将在细胞沉降时进行，而细胞通常位于液体的上半部，这显著减少了由板或边缘效应引起的畸变影响，从而提升了细胞检测的准确性。

在克隆后阶段，UPSIGHT20能够对具有理想生长曲线的特定克隆进行成像并监测其群体生长。整个成像过程快速高效，实现了在约3分钟内处理一个384孔的板，极大地促进了高通量群体追踪的能力。

结合喷嘴图像与3D全孔成像的技术，UPSIGHT20为单克隆细胞分配提供了强有力的保证。尽管传统方法在准确性上存在某些局限，UPSIGHT20的算法和成像系统却能有效避免这些问题，提高单细胞分配的准确性和效率。研究表明，UPSIGHT20的双重验证机制实现了高达9999%的单克隆概率，同时显著提高了成像速度和实验效率。

总之，UPSIGHT20不仅提升了单细胞研究的精准性和效率，还为未来的细胞生物学研究提供了坚实的技术支持。尊龙凯时(中国区)人生就是搏的这一技术创新将推动细胞研究领域的进步，为深入理解细胞行为和特性奠定基础。